科学家尝试使用Cre/loxP位点特异*重组系统，在检测目的基因导入成功后，删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因...

问题详情：

科学家尝试使用Cre/loxP位点特异*重组系统，在检测目的基因导入成功后，删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因．其技术过程如下（图中的■代表基因前的启动子），据图回答：

（1）loxP是由34个碱基对构成的小型DNA片段，有两个13个碱基对反向重复序列和中间间隔的8个碱基对序列组成（如下图）．对于这种已知序列的小型DNA，通常用        方法获取．

（2）loxP自身不会表达，*入质粒后也不影响原有基因的表达．Cre酶能特异*地识别此序列并在箭头处切开loxP上的**二酯键，其功能类似于基因工程中的     　酶．从遗传学角度分析，Cre酶改变质粒产生的结果相当于可遗传变异中的　      　．

（3）除图示外，重组质粒中通常还应具有　             　结构；重组质粒上抗除草剂基因的作用是　                         　；将重组质粒导入到植物细胞中最常用的方法是　            　．

（4）经检测重组质粒转导成功后，抗除草剂基因已没有用途，继续留在植物体内可能会扩散转移造成安全问题．经Cre酶处理后，质粒中的两个loxP序列分别被切开后，可得到如上图右侧的这两个DNA分子．由于　            　的原因，抗除草剂基因不再表达，之后会在培养过程中消失．

（5）loxP序列是有方向*的．如果经Cre酶处理后，发现抗除草剂基因反向连接在质粒一上，则原来质粒一中这两个loxP序列的方向是　         　．

A．两个都是正向B．两个都是反向C．一个正向一个反向  D．与方向无关．

【回答】

解：（1）基因工程中，对于已知序列的小型DNA，通常用人工（化学）合成方法获取．

（2）限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷*序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷*之间的**二酯键断裂．Cre酶能特异*地识别此序列并在箭头处切开loxP，其功能类似于基因工程中的限制酶．从遗传学角度分析，Cre酶改变质粒产生的结果相当于可遗传变异中的基因重组．

（3）基因表达载体的组成包括：目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点等．重组质粒上抗除草剂基因的作用是作为标记基因，用于检测目的基因是否导入成功；将重组质粒导入到植物细胞中最常用的方法是农杆菌转化法．

（4）由于抗除草剂基因前没有了启动子的原因，因此抗除草剂基因不再表达，之后会在培养过程中消失．

（5）loxP序列是有方向*的．据图分析，如果经Cre酶处理后，发现抗除草剂基因反向连接在质粒一上，则原来质粒一中这两个loxP序列的方向是一个正向一个反向．故选：C．

故*为：

（1）人工（化学）合成

（2）限制酶　  基因重组　

（3）复制原点、终止子  作为标记基因，用于检测目的基因是否导入成功   农杆菌转化法　

（4）抗除草剂基因前缺乏启动子　

（5）C

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题