绿*荧光蛋白（GFP）能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移...

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绿*荧光蛋白（GFP）能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能．下图为我国首例绿*荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

（1）图中通过过程①②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒．限制酶Ⅰ的识别序列和切点是﹣G↓GATCC﹣，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是﹣↓GATC﹣．在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点．

①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后形成黏*末端的过程．       （只写出切割后形成的部分即可）

②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏*末端能否连接起来？   ，理由是                                                                     ．

（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是            ．

（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是                           ．

获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是                    ．

（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝*荧光蛋白、黄*荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝*荧光蛋白过程的正确顺序是：                （用序号表示）．

①推测蓝*荧光蛋白的氨基*序列和基因的核苷*序列   ②蓝*荧光蛋白的功能分析和结构设计

③蓝*荧光蛋白基因的修饰（合成）                  ④表达出蓝*荧光蛋白．

【回答】

（1））①

②可以连接由两种不同限制酶切割后形成的黏*末端是相同的（或是可以互补的）

（2）显微注*法

（3）鉴定受体细胞中是否含有目的基因   供体器官不足和免疫排斥       

（4）②①③④

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题