(2018山东省实验中学一模)某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素...
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(2018山东省实验中学一模)某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示,请回答下列问题。
(1)抗盐基因是否在烟草细胞中稳定遗传的关键是 。
(2)在构建重组质粒时,应选用 和 两种酶对目的基因和质粒进行切割,以保*重组DNA序列的唯一*。
(3)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法。含有目的基因的农杆菌可根据标记基因进行筛选。若农杆菌在含有氨苄青霉素和四环素的培养基上都可以生长繁殖,农杆菌中是否已含有目的基因? (填“是”或“否”)。为什么? 。
(4)愈伤组织经 形成完整植株,这一过程需要再转接到 培养基上进行培养,该过程的实质是 。
【回答】
(1)抗盐基因(目的基因)是否*入到烟草的染*体DNA上
(2)HindⅢ SalⅠ
(3)否 含有目的基因的质粒抗四环素的基因被破坏
(4)再分化 分化 基因的选择*表达
解析 (1)抗盐基因是否在烟草细胞中稳定遗传的关键是抗盐基因(目的基因)是否*入到烟草的染*体DNA上。(2)只用SalⅠ酶切割含有目的基因的DNA与质粒,形成相同的黏*末端,容易发生自身连接和反向接入,BamHⅠ会破坏目的基因,则在构建重组质粒时,应选用SalⅠ、HindⅢ两种酶对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割,以保*重组DNA序列的唯一*。(3)选用SalⅠ、HindⅢ两种酶对质粒进行切割时,形成的重组质粒中含抗氨苄青霉基因而抗四环素基因被破坏,故农杆菌中不含有目的基因。(4)愈伤组织经再分化,形成完整植株,这一过程需要再转接到分化培养基上进行培养,细胞分化的实质是选择*表达。
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:综合题
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