人體移植器官短缺是一個世界*難題。目前，科學家正試圖利用基因工程方法對豬的器官進行改造，再結合克隆技術，培養出...

問題詳情：

人體移植器官短缺是一個世界*難題。目前，科學家正試圖利用基因工程方法對豬的器官進行改造，再結合克隆技術，培養出沒有免疫排斥反應的轉基因克隆豬器官。如圖爲科學家藉助CPISPR﹣Cas9基因編輯技術剔除豬抗原決定基因的示意圖（不同的sgRNA可以識別不同的DNA序列），請回答下列問題：

（1）DNA重組技術主要用到的工具酶包括DNA連接酶和　           　。圖中充當該酶的物質是　          　。

（2）Cas9﹣sgRNA複合體能夠精準識別某核苷*序列的原因可能是　             　。

（3）培育轉基因豬時，應使用　          　技術將剔除了豬抗原決定基因的基因表達載體匯入豬成纖維細胞中，再將該細胞的細胞核注入　            　期的去核卵母細胞中，構建重組胚胎。

（4）胚胎培養液中除了一些無機鹽和有機鹽外，還需要添加“兩素”（維生素、激素）、“兩*”等營養成分，以及血清等物質，其中“兩*”是指　       　。

【回答】

（1）限制*核*內切酶（限制酶）    Cas9﹣sgRNA 複合體

（2）sgRNA（是單鏈）可與特定（靶）核苷*序列鹼基互補配對

（3）顯微注*    減數第二次*中期（MⅡ中期）

（4）氨基*和核苷*

【分析】由圖可知，使用CRISPR﹣Cas9系統進行基因編輯時，sgRNA分子的鹼基序列與基因組DNA中特定鹼基序列根據鹼基互補配對原則結合在一起，該過程不需要酶催化，然後由Cas9催化**二酯鍵水解，從而使DNA分子斷裂，再由DNA連接酶將切斷的DNA與提供的修復模板連接起來。

【解答】解：（1）DNA重組技術即基因工程，主要用到的工具酶是DNA連接酶和限制酶；由以上分析可知：Cas9﹣sgRNA複合體應該是一種限制*核*內切酶。

（2）使用CRISPR﹣Cas9系統進行基因編輯時，sgRNA分子的鹼基序列與基因組DNA中特定鹼基序列根據鹼基互補配對原則結合在一起，從而能夠精準識別該核苷*序列（sgRNA（是單鏈）可與特定（靶）核苷*序列鹼基互補配對）。

（3）將目的基因（基因表達載體）注入動物細胞的最有效方法是顯微注*技術；將該轉基因豬的細胞核注入減數第二次*中期時期的卵母細胞中，構建重組胚胎。

（4）胚胎培養液中除了一些無機鹽和有機鹽外，還需要添加“兩*、兩素”以及動物血清，其中的“兩*”是指氨基*和核苷*。

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知識點：現代生物科技 單元測試

題型：綜合題