基因表达载体的构建是基因工程的核心.图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列,图2表示目的基因及限制酶切点,图3表示目...
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基因表达载体的构建是基因工程的核心.图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列,图2表示目的基因及限制酶切点,图3表示目的基因上的DNA片段,图4表示质粒.请回答下列问题:
(1)若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA,就其特异*而言,切开的是 之间相连的化学键.
(2)图3为目的基因中的某一片段,下列有关叙述正确的是 .
A.若图中的ACT能决定一个氨基*,则ACT可称为一个密码子
B.DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处,解旋酶作用于①处
C.若只用这个片段中的3个碱基对,排列出的DNA片段有64种
D.就游离的**基而言,该片段与重组质粒相比多了2个游离的**基
(3)若利用PCR技术增加目的基因的数量,由图2可知,A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取 作为引物(DNA复制子链的延伸方向5′→3′).该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生等长的目的基因片段 个.
(4)为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选,提高重组效率,应该选择的限制酶是 .如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割,假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等,则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有 种.
(5)如果大肠杆菌是受体细胞,则其体内应不含 基因,以利于筛选出含重组质粒的受体菌.目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质,其遗传学基础是 .
【回答】
解:(1)DNA分子的一条多核苷*链中,两个脱氧核苷*之间以**基团和五碳糖相连.由题目可知,EcoRⅠ识别的DNA序列只有G和A,故切开的是鸟嘌呤脱氧核苷*和腺嘌呤脱氧核苷*之间相连的化学键.
(2)A、密码子是mRNA上决定一个氨基*的3个相邻的碱基,若图中的ACT能决定一个氨基*,则其对应的密码子是UGA,A错误;
B、DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②**二酯键处,解旋酶作用中①*键处,B正确;
C.A和T之间有2个*键,C和G之间有3个*键,因此若只用这片段中的3个碱基对,可以排列出23种片段,C错误;
D.就游离的**基而言,该片段有2个游离的**基,而重组质粒不含游离的**基,因此该片段与重组质粒相比多了2个游离的**基,D正确.
故选:BD.
(3)若利用PCR技术增加目的基因的数量,由图2可知,DNA复制只能从5’到3’,因此构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取 B和C 作为引物,该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生基因片段16个,其中等长的目的基因片段8个.
(4)为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选,提高重组效率,四环素抗*基因没有被破坏,gu8 应该选择的限制酶是 PstⅠ、EcoRⅠ.如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割,假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等,若Pst I酶的切割位点用1表示,EcoR I酶的切割位点用2表示,HindⅢ酶的切割位点用3表示,则形成的DNA片段1→2,2→1,2→3,3→2,1→3,3→1六种片段,其中只有2→1片段含有完整四环素抗*基因,即含有完整四环素抗*基因的DNA片段只有1种.
(5)如果大肠杆菌是受体细胞,则其体内应不含 抗四环素基因 基因,以利于筛选出含重组质粒的受体菌.目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质,其遗传学基础是 各种生物共用一套密码子.
故*为:
(1)鸟嘌呤脱氧核苷*和腺嘌呤脱氧核苷*
(2)BD
(3)B和C 8
(4)PstⅠ、EcoRⅠ1
(5)抗四环素基因 各种生物共用一套密码子
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题
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