某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此...

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某质粒上有SalⅠ、Hind Ⅲ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。

 (1)将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐*状，这种新*状(变异*状)的来源属于                         。

(2)在构建重组质粒时，应选用          和         （填SalⅠ、Hind Ⅲ、BamHⅠ）两种酶对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割，以保*重组DNA序列的唯一*。

 (3)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，上图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有                   、                   。

从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是___    __（填序号）菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放**同位素标记的             作探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌烟草植株的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐*。

(4)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用                     技术，愈伤组织经细胞的增殖和分化进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加                                 。

⑸下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(图示部分基因及部分限制*内切酶作用位点)，据图分析：

①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应*入                         。

②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的之一是去除质粒上的                 (基因)，保*T－DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限*和生长。

③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是                                                。

【回答】

 (1) 基因重组        

(2) SalⅠ、Hind Ⅲ（两个都答对给1分）

(3) 氨苄青霉素　    四环素(氨苄青霉素和四环素)   　4和6     　抗盐基因　

(4) 植物组织培养　          　植物激素(生长素和细胞*素)

(5) ①启动子         ②tms和tmr（答全给分，多答tet，不扣分）　

③在含卡那霉素的培养基中能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题