在如图所示的质粒PZHZ11（总长为4.0kb，1kb=1000对碱基因）中，lacZ基因编码β﹣半乳糖苷酶，...

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在如图所示的质粒PZHZ11（总长为4.0kb，1kb=1000对碱基因）中，lacZ基因编码β﹣半乳糖苷酶，后者催化生成的化合物能将白*的大肠杆菌染成紫*．

（1）若先用限制酶BamHI切开pZHZ11，然后灭活BamHI酶，再加DNA连接酶进行连接，最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中，则含4.0kb质粒的细胞颜*为　                       　，含3.5kb质粒的细胞颜*为　    　．

（2）若将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段，形成5.0kb的重组质粒，则目的基因长度为　   　kb．

（3）上述5.0kb的重组质粒有两种形式，若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种，只能获得2.0kb和3.0kb两种DNA片段；那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒，则可获得　    　kb和　     　kb两种DNA片段．

（4）若将人的染*体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因，然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达，最后将产物的*物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥，那么上述过程属于　    　

A．人类基因工程   B．动物基因工程     C．植物基因工程   D．微生物基因工程．

【回答】

解：（1）若先用限制酶BamHⅠ切开pZHZ11，然后灭活BamHI酶，则破坏了lacZ基因，导致β﹣半乳糖苷酶不能合成．而β﹣半乳糖苷酶催化生成的化合物能将变*的大肠杆菌染成蓝*，所以含3.5kb质粒的细胞颜*为白*；含4.0kb质粒的细胞中，如果lacZ基因能正常表达，则颜*为紫*；如果lacZ基因不能正常表达，则颜*为白*．

（2）若将两段分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段，形成5.0kb的重组质粒，则目的基因长度为5.0﹣（4.0﹣0.5）=1.5kb．

（3）上述5.0kb的重组质粒有两种形式，若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种，只能获得2.0kb和3.0kb两种DNA片段，说明右侧BamHI和EcoRI之间的长度为2.0；用联合酶切同等长度的另一种重组质粒，则切割的是BamHI左侧的位点，可获得2.0+1.5=3.5kb和5.0﹣3.5=1.5kb两种DNA片段．

（4）由于将人的染*体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并坚定目的基因，然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达，并将产物的*物单独注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥，所以该过程属于植物基因工程．

故*为：

（1）白*和紫*/白*或紫*    白*

（2）1.5

（3）1.5    3.5

（4）C

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题