下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析...

问题详情：

下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题．

资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种*基营养型酵母菌，能将*醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达．

资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染*体发生同源重组，将目的基因整合于染*体中以实现表达．

（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上      、         限制酶识别序列，这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化．

（2）酶切获取HBsAg基因后，需用          将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取                             ．

（3）步骤3中应选用限制酶        来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞．

（4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用                方法进行检测．

（5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入      以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达．

（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行              并分泌到细胞外，便于提取．

【回答】

（1）SnaBⅠAvrⅡ

（2）DNA连接酶    大量重组质粒

（3）BglⅡ

（4）DNA分子杂交

（5）*醇

（6）加工（修饰）

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题