（一）回答与泡菜制作有关的问题：（1）用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生

问题详情：

（一）回答与泡菜制作有关的问题：

（1）用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生_____，从而使成品泡菜口感较脆。同时，该处理也会使泡菜发酵时间缩短，其原因是_______。

（2）泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并水封，会使______菌被逐渐抑制。发酵中期，乳*菌大量繁殖，会使______菌受到抑制。发酵后期，乳*生产过多，会使乳*菌受到抑制。

（3）从泡菜汁中可分离制作*奶的乳*菌，首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后取滤液进行______，再用______的方法在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。该培养基必须含有______，以便于观察是否产*。

（4）自然界中醋杆菌常与乳*菌共同生长。若要筛选出醋杆菌，则其专用的培养基中应添加______。

（二）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：

（1）为了获取某植物叶片无菌的原生质体，先将叶片经表面消毒并去除下表皮，再将其置于经______处理的较高渗透压的混合酶液中。酶解后，经多次离心获得原生质体。然后测定该原生质体的活*，可采用的方法有______（答出2点即可）。

（2）若要获得已知序列的抗病基因，可采用______或PCR的方法。为了提高目的基因和质粒重组的成功率，选择使用______，对含目的基因的DNA片段进行处理，使其两端形成不同的粘*末端，对质粒也进行相同的处理，然后用DNA连接酶连接形成重组质粒。通过在大肠杆菌中______，以获得大量的重组质粒，最终将其导入原生质体中。

（3）原生质体在培养过程中，只有重新形成______后，才可进行有丝*。多次*形成的小细胞团可通过______或器官发生的途径再生植株。

【回答】

果胶酶    细胞破裂，细胞内营养物质外流使乳*菌快速地获得营养物质    喜好氧的    不耐*的    稀释    涂布分离    *碱指示剂    乙醇    过滤灭菌    染*法，渗透吸水或失水    化学合成    两种限制*核*内切酶    扩增    细胞壁    胚胎发生   

【解析】

【分析】

泡菜制作：

①菌种：假丝酵母和乳*菌；②发酵原理：在无氧条件下，微生物利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵，发酵产物有有机*和醇类物质等，还有亚**。③亚**盐的测定：亚**盐可与对氨基苯磺*发生重氮化反应，这一产物再与N-1-萘基乙二*偶联，形成紫红*产物，可用光电比*法定量。

【详解】

（一）

（1）用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜时，为抑制某些微生物产生果胶酶，从而使成品泡菜口感较脆，可用热水短时处理。同时，该处理也会使细胞破裂，细胞内营养物质外流使乳*菌快速地获得营养物质，从而使泡菜发酵时间缩短。

（2）泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并水封，形成无氧环境，会使喜好氧的菌被逐渐抑制。发酵中期，乳*菌大量繁殖，产生乳*，会使不耐*的菌受到抑制。发酵后期，乳*生产过多，又会抑制乳*菌。

（3）从泡菜汁中可分离制作*奶的乳*菌，首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后取滤液进行稀释，再用涂布分离的方法在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。为了便于观察是否产*，该培养基必须含有*碱指示剂。

（4）自然界中醋杆菌常与乳*菌共同生长。由于醋*杆菌可以利用乙醇产生醋*，若要筛选出醋杆菌，则其专用的培养基中应添加乙醇。

（二）

（1）为了获取某植物叶片无菌的原生质体，先将叶片经表面消毒并去除下表皮，再将其置于经过滤灭菌处理的较高渗透压的混合酶液中。酶解后，经多次离心获得原生质体。可采用染*法、渗透吸水或失水的方法测定该原生质体的活*。

（2）可采用人工合成或PCR的方法获得已知序列的抗病基因。对含目的基因的DNA片段进行处理，为使其两端形成不同的粘*末端，需要选择使用两种限制*核*内切酶，对质粒也进行相同的处理，为了提高目的基因和质粒重组的成功率，然后用DNA连接酶连接形成重组质粒。通过在大肠杆菌中扩增，以获得大量的重组质粒，最终将其导入原生质体中。

（3）原生质体在培养过程中，只有重新形成细胞壁后，才可进行有丝*。多次*形成的小细胞团可通过胚胎发生或器官发生的途径再生植株。

【点睛】

本题考查选修教材中的相关知识，在学习本部分内容时，要求考生对所学知识进行对比、归纳，然后建立知识间的联系，做到夯实基础，学会融会贯通。

知识点：生物技术在食品加工及其他方面的应用

题型：综合题